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驚訝!離心機在微生物實驗實驗中的地位這麽高

發布時間:2020-12-26 15:58:22      點擊:

  離心機在微生物實驗中得地位多高,可以用這麽一句話來說——沒用離心機恐怕完成不了實驗!

  比如原代細胞的提取,有一個懸浮細胞的分離方法:

  1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,離心機1000rpm/分鍾離心5分鍾。

  2、去掉上清,離心沉澱用無鈣、鎂的PBS清洗後離心機1000rpm/分鍾離心5分鍾。此步重複兩次。

  3、用培養基重懸,調整適當細胞濃度後分瓶培養。

  4、如選用懸液中某種細胞,可采用離心後的細胞分層液收獲目的細胞。

  再比如細胞懸液機械裂解後有很多細胞碎片,如何去掉這些碎片呢?j9九遊會先來看看各種方法:

  1.采用稀釋法。細胞稀釋後還能增殖,會越來越多,而細胞碎片相應地會越來越少。

  2.還有自然沉降法。細胞要比大多數碎片沉降得快一些::將細胞懸液移到離心管中,等細胞大部分下沉時,可將上液吸棄,再加入培養液懸浮細胞,此方法可反複使用,同時每次可顯微鏡下觀察是否符合你的要求。

  3.低速離心機可以去除碎片,一般700g,5mins

  4.離心的時候,在細胞數足夠的條件下,減少離心時間,如平時5min,1000rpm,改為3min,1000rpm,去上清,因為壞死和碎片一般都在上清裏!這樣的操作隻需要在孵育前洗滌過程中操作一次就可以了!

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  雖然細胞碎片清除辦法很多,但是你會發現,用離心去除是眾多辦法裏麵效率最高的!

  而且植物組織和細胞由於具有纖維素、半纖維素和果膠等物質組成的細胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當的提取液一起研磨的方法或用纖維素酶處理也能達到目的。細菌細胞的破碎比較麻煩,因為整個細菌細胞壁的骨架實際上是一個借共價鍵連接而成的肽聚糖囊狀大分子,非常堅韌。破碎細菌細胞壁的常用方法有超聲波破碎,與砂研磨、高壓擠壓或溶菌酶處理等。組織和細胞破碎後,選擇適當的緩衝液把所要的蛋白提取出來。細胞碎片等不溶物用離心機或過濾的方法除去。


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